摘要：试验选用48头泌乳期荷斯坦奶牛分4组，每组12头。对照组TMR不添加苜蓿；试验Ⅰ组在与对照组精粗比相同前提下添加2kg/d优质苜蓿替代部分羊草和玉米青贮；试验Ⅱ、Ⅲ组分别添加4、6kg/d优质苜蓿替代部分精料，探讨不同比例美国苜蓿对奶牛泌乳性能、消化代谢以及血液生化指标的影响。
结果表明：试验Ⅰ组奶牛产奶量显著高于其他各组（P<0.05），乳脂率随着苜蓿添加量增加而增加（P<0.05），试验Ⅰ和Ⅱ组乳干物质、乳蛋白和乳糖产量显著高于对照组（P<0.05）。
对照组与各试验组间氮平衡及氮效率无显著差异（P>0.05），NDF和ADF表观消化率随苜蓿添加量的增加而增加（P>0.05）。试验Ⅰ组白球比最高（P<0.05）。综上所述，TMR中添加一定比例优质苜蓿干草可以提高奶牛生产性能、改善乳品质、维持奶牛良好的健康状况，其中添加量为2kg/d效果最佳。
苜蓿是一种重要的优质粗饲料，蛋白质含量高，富含各种氨基酸、维生素、胡萝卜素、叶黄素、钙、磷、异黄酮类物质，可消化纤维含量高，营养平衡而全面，被世界上誉为“饲草之王”，是饲养奶牛不可缺少的优质粗饲料。用苜蓿饲养奶牛不但可以明显改善牛奶质量，提高乳脂和乳蛋白率，而且对高产奶牛维持其产奶量有较大作用。
有试验表明，我国许多奶牛场TMR能量不足已成为影响牛奶产量的重要因素。如果简单的提高精料的使用量来提高日粮的能量水平，可以较快的提高奶产量，但却容易造成瘤胃环境恶化，导致奶牛瘤胃酸中毒、蹄病和真胃变位等疾病，从而影响牛场经济效益。对此，使用优质粗饲料替代部分精料改善日粮精粗比例，可能会是一个较好的解决途径。
近年来，美国进口苜蓿凭借其较高的相对牧草饲用价值（RVF）而引起关注并加速进入我国市场，但其实际的应用效果以及合理的添加量还有待进一步研究。本试验旨在探讨TMR中添加不同比例的美国苜蓿干草对奶牛泌乳性能、消化代谢以及血液生化指标的影响，并以此确定其合理的添加量。
1 材料与方法
1.1 试验动物及日粮
选用48头体况良好，平均胎次为2.3胎，产奶量为（21.7±4.2）kg的泌乳期荷斯坦奶牛，苜蓿干草购于美国Anderson公司，其营养成分见表1。试验期间奶牛的基础日粮组成和营养成分见表2。
注：产奶净能（MJ/kg干物质）＝0.5501 × 消化能（MJ/kg干物质）－0.3958，能量消化率（％）＝91.6694-91.3359（ADF/OM）
1.3 试验设计与饲养管理
将48头奶牛分为4组，每组12头。对照组不添加苜蓿（自由采食TMR），试验Ⅰ组在日粮精粗比与对照组相同的前提下添加2kg/d优质苜蓿替代羊草和玉米青贮，试验Ⅱ、Ⅲ组分别添加4、6kg/d优质苜蓿并根据能氮平衡相应的替代1.74kg/d和3.48kg/d精料。奶牛每天饲喂3次，在自由采食过程中进行管道式挤奶（04:30、12:30、20:00）。预试期15d，正试期50d。
1.4 样品采集与分析
1.4.1 粪尿与饲料样品
正试期第47d开始从每组中选择3头奶牛连续3d全收粪尿。分别准确称量每头牛每天的排粪、尿量，混合均匀后取样。收集好的粪加入1/4粪重10%的酒石酸混匀，65℃烘干回潮，制备风干粪样以备分析。为防止尿样的腐败分解，在集尿桶中预加10%的稀盐酸200mL，4层纱布过滤取样，-20℃冷冻保存。
同时收集TMR饲料和剩料样品，在65℃烘箱中烘48h，测定干物质含量，并记录采食量，剩料量控制在采食量的5%～10%。按照AOAC的方法测定饲料和粪样中的干物质（DM）、粗蛋白质（CP）和粗灰分（Ash）以及尿氮含量。按照VanSoest等的方法测定饲料和粪样的中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量。
1.4.2 血液与奶样
经过15d的预试期后每隔10d测一次产奶量并收集奶样和血样。奶样按早中晚4∶3∶3的比例收集50mL奶样2瓶，其中一瓶加入重铬酸钾后立即送到北京奶牛中心检测乳常规（乳干物质、乳脂、乳蛋白和乳糖）；另一瓶奶样立即-20℃冷冻，用于测定尿素氮含量。血样是在奶牛晨饲前通过尾静脉采血10mL，3000r/min离心10min分血清，-20℃冷冻保存。血清样品送往北京华英生物技术研究所测定血清中尿素氮、白蛋白、球蛋白和β-羟基丁酸浓度表示。
1.5 统计分析
数据采用Excel2007整理，采用SPSS17.0软件中Duncan's进行多重比较。结果均以平均值±标准差表示。
2 结果与分析
2.1 添加不同比例的优质苜蓿对产奶量和乳成分的影响
由表3可见，试验Ⅰ组奶牛产奶量显著高于其他各组（P<0.05）。乳脂率随苜蓿添加量的增加而增加，试验Ⅱ和Ⅲ组显著高于对照组（P<0.05）。各组间干物质、乳蛋白、乳糖和牛奶尿素氮（MUN）含量差异不显著（P>0.05），但试验Ⅰ和Ⅱ组干物质、乳蛋白和乳糖含量显著高于对照组和试验Ⅲ组（P<0.05），其中试验Ⅰ组的各乳成分含量最高。
表3 添加优质苜蓿对奶牛产奶量和乳成分的影响
2.3 添加不同比例的优质苜蓿对血液生化指标的影响
由表5可见，血液总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）球蛋白（GLB）、β-羟基丁酸（BHBA）和尿素氮浓度差异不显著（P>0.05），但试验Ⅰ组白球比（A/G）显著高于试验Ⅲ组（P<0.05）。
3 讨论
3.1 添加不同比例的优质苜蓿对产奶量和乳成分的影响
本试验在日粮精粗比相同的情况下，试验Ⅰ组（添加2kg苜蓿）产奶量显著高于对照组，说明美国进口苜蓿与羊草和玉米青贮相比具有更高的营养价值。日粮粗蛋白质含量是影响奶牛产奶量的一个重要因素，添加苜蓿可以增加小肠内过瘤胃蛋白质的数量，这可能是提高产奶量的主要原因。
但随着苜蓿添加量的增加（试验Ⅱ和Ⅲ组），产奶量有降低的趋势，这可能是由于试验Ⅱ和Ⅲ组精料饲喂量减少所致。随着苜蓿添加量的增加，乳脂率显著增加。
由于奶牛在泌乳期间乙酸是合成乳脂的主要前体物，当日粮中粗纤维含量上升时，瘤胃内纤维分解菌占优势，这使挥发性脂肪酸（VFA）中的乙酸比例上升，从而乳脂含量提高。苜蓿干草粗纤维成分中含有较多的NDF，适量的NDF不但对健康有利，而且可以提高乳脂率。
同时，苜蓿干草中含有丰富的烟酸，烟酸是辅酶I和辅酶II的重要组成成分，这都利于乳脂合成。另外，MUN浓度的高低直接影响奶牛的健康，对评价奶牛饲养水平有着重要意义。
通常情况下一个正常的牛群其平均MUN浓度在6～20mg/dL，最佳浓度为7～12mg/dL，小于7mg/dL表明日粮粗蛋白不足或瘤胃降解与非降解蛋白不平衡。
本试验各组MUN浓度均于国外水平，这可能是因为日粮中粗蛋白含量偏低，或者日粮配比达到很好的瘤胃能氮平衡，大于12mg/dL表明日粮粗蛋白过量或瘤胃可发酵NFC不足。本试验各组MUN浓度均在合理范围之内，说明日粮配比达到很好的瘤胃能氮平衡。
3.2 添加不同比例的优质苜蓿对日粮消化率和氮代谢的影响
本试验中，各组奶牛的氮平衡均为正值，表明日粮中有足够的能量来满足产奶需要，因为氮的沉积过程需要能量的支撑。
另外，NDF表观消化率随着苜蓿添加量的增加而显著增加，可能是因为苜蓿属易发酵干草，其在瘤胃的降解率较高，而较低精粗比的日粮会改善瘤胃酸碱环境，有利于消化粗纤维菌群的增殖等，进而促进了粗纤维的消化。
3.3 添加不同比例的优质苜蓿对血液生化指标的影响
血液中白蛋白和球蛋白浓度主要反映奶牛的肝脏损伤及其免疫情况。在肝功能正常情况下，白蛋白要高于球蛋白，A/G正常值范围在1.1～2.2间波动。本试验各组奶牛血液总蛋白、白蛋白和球蛋白浓度差异不显著，但均在正常值范围之内，表明奶牛健康状况良好。
β-羟基丁酸（BHBA）是能量代谢的产物，作为判断奶牛酮病的重要指标，一般认为血液中BHBA浓度高于2.0mmol/L，牛就有可能发生酮病[10]，并且越是高产奶牛，酮病的发生率越高。本试验中各组奶牛血液BHBA浓度远低于2.0mmol/L，表明奶牛均没有酮病症状，健康状况良好。
4 结论
TMR中添加一定比例的美国进口苜蓿可以显著提高奶牛奶产量和乳脂率，有改善乳品质的作用；随着苜蓿添加量的增加能够显著提高NDF的表观消化率，但对奶牛氮平衡和氮效率没有影响，均能维持奶牛良好的健康状况。综合判断，在苜蓿添加量为2kg/d时，效果最佳。
